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PCR實(shí)操避坑分享發(fā)布時(shí)間：2025-09-28

前段時(shí)間和大家分享了PCR反應(yīng)的過(guò)程控制，今天來(lái)聊聊PCR的操作手法。實(shí)操可以說(shuō)是整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)流程中最容易被忽略卻又至關(guān)重要的一環(huán)。下面小編就來(lái)分享一下自己當(dāng)初的一些經(jīng)驗(yàn)心得，僅代表個(gè)人看法。先說(shuō)體系配置（各組分分開(kāi)，非預(yù)混液）。配置前先計(jì)算好所需要的各組分體積，統(tǒng)一配置好后再...

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2022
1-11

熒光定量PCR的理論依據(jù)是什么？
熒光定量PCR在反應(yīng)中，引入了一種熒光化學(xué)物質(zhì)，隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化。從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線...
2022
1-4

二維梯度PCR的應(yīng)用領(lǐng)域有哪些？
PCR技術(shù)從發(fā)明至今已有二十多年的時(shí)間，用于PCR實(shí)驗(yàn)的儀器不斷的推陳出新。然而PCR的基本過(guò)程沒(méi)有太大變化，包括變性-退火-延伸這三步。這其中包括反應(yīng)條件、使用試劑的量甚至是引物等，很多研究者在進(jìn)行PCR優(yōu)化時(shí)都會(huì)考慮退火溫度的優(yōu)化，這時(shí)...
2021
12-27

實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀保養(yǎng)及維護(hù)方法
高分辨率溶解（HRM）作為一種聯(lián)管式的PCR后分析技術(shù)，引起了學(xué)術(shù)界的廣泛關(guān)注。HRM基于DNA雙鏈的溶解特性對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行分析，與傳統(tǒng)的溶解曲線分析類似，但提高更多的信息，因而具有更廣泛的應(yīng)用?？筛鶕?jù)PCR產(chǎn)物的序列、長(zhǎng)度、GC含量或鏈...
2021
12-18

雙槽二維梯度PCR儀該如何設(shè)置合適的退火溫度？
雙槽二維梯度PCR儀就是將多個(gè)的PCR反應(yīng)放在一起做，不用一次一次的作很多次，溫度梯度PCR可以很快的找出適合的退火溫度，或者說(shuō)可以在適合的退火溫度下擴(kuò)增出目的條帶。除具標(biāo)準(zhǔn)PCR儀功能外，其梯度模塊還能同時(shí)進(jìn)行多達(dá)12個(gè)不同退火溫度的PC...
2021
12-8

手動(dòng)移液器使用期間注意事項(xiàng)
手動(dòng)移液器是一種長(zhǎng)期使用的工具，廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室。由于每天都要使用數(shù)小時(shí)，在選擇時(shí)人體工程學(xué)和個(gè)人偏好（例如握持舒適性）是非常重要的標(biāo)準(zhǔn)。在尋找適合工作的移液器時(shí)，還需要考慮其它因素，如應(yīng)用、實(shí)驗(yàn)室工作流程、所需的量程范圍、樣品的物理特性...
2021
12-1

細(xì)胞凍存盒的實(shí)驗(yàn)步驟，您都知道嗎？
什么是細(xì)胞凍存？細(xì)胞長(zhǎng)勢(shì)良好，供大于求時(shí)，就可以考慮把細(xì)胞凍存起來(lái)，以后再用。當(dāng)溫度低于-70℃時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性全部停止，代謝活動(dòng)停止，故可以達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的。隨著溫度降低，細(xì)胞內(nèi)外的水分都會(huì)結(jié)晶，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞...

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